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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測試劑盒-常量法土壤系列BC0480-50T/24S土壤FDA水解酶活性檢測試劑盒

土壤FDA水解酶活性檢測試劑盒
產(chǎn)品簡介:

儲存條件
-20℃
中文名稱
土壤FDA水解酶活性檢測試劑盒
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Soil FDA Hydrolase Activity Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/24S

產(chǎn)品型號:BC0480-50T/24S

更新時間:2025-08-29

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :4144

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品介紹

土壤FDA水解酶活性檢測試劑盒說明書

可見分光光度法

注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。

貨號:BC0480

規(guī)格:50T/24S

產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱

規(guī)格

保存條件

試劑一

液體30 mL×1瓶

2-8℃保存

試劑二

粉劑×2支

-20℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

粉劑×1瓶

-20℃保存

溶液的配制:

1、 試劑二:臨用前取1支加1.5 mL丙酮溶解,用不完的-20℃分裝保存一周,避免反復(fù)凍融;

2、 標(biāo)準(zhǔn)品:10 mg熒光素,臨用前加入3.03 mL 50%丙酮(丙酮(V):蒸餾水(V)=1:1)配成10 μmol/mL的熒光素標(biāo)準(zhǔn)溶液,可45℃水浴促進溶解,-20℃分裝保存兩周,避免反復(fù)凍融。

產(chǎn)品說明:

FDA水解反應(yīng)能很好的反應(yīng)土壤中微生物活性和土壤質(zhì)量的變化以及生態(tài)系統(tǒng)中有機質(zhì)的轉(zhuǎn)化,是土壤質(zhì)量研究中的重要生物學(xué)指標(biāo)之一。

FDA是一種無色化合物,在介質(zhì)中能被許多土壤酶所催化水解,并經(jīng)脫水反應(yīng),產(chǎn)生酶解終產(chǎn)物熒光素,穩(wěn)定不易被分解,并在490nm處有強吸收峰,通過檢測490nm處的吸光值變化可計算得FDA水解酶活性。

注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。


需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、天平、臺式離心機、恒溫水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、丙酮(不可快遞)、研缽、30-50目篩。


三、FDA水解酶活性計算

酶活性定義:每克土壤每天產(chǎn)生1μmol 熒光素的量為一個酶活力單位。

FDA活性(U/g 土樣)=(ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×C標(biāo)準(zhǔn)品)×V反總÷W ÷T=48×(ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn))÷W

C標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品濃度 2μmol/mL;V反總:反應(yīng)總體積,1mL;W:樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時間,1h=1/24d。

注意事項:

1. 盡量采用新鮮土樣或者短期低溫保存樣本,否則很難準(zhǔn)確反映酶的活性。

2. 測定之前進行預(yù)實驗,若吸光值大于1.2,可適當(dāng)減少土樣質(zhì)量再測定。若吸光值過小,可增加土樣質(zhì)量或增加反應(yīng)時間來進行測定。


實驗實例:

1、 分別取兩管0.1g三葉草土于1.5mLEP管中,分別為對照管及測定管,按照測定步驟操作,取上清稀釋5倍進行測定,用1mL玻璃比色皿測定吸光值,計算ΔA測定=A測定-A對照=1.148-0.066=1.082,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.499-0=0.499,按土壤質(zhì)量計算酶活得:

FDA活性(U/g 土樣)=48×(ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn))÷W×5(稀釋倍數(shù))= 5204.01 U/g 土樣。

2、 分別取兩管0.1g林土于1.5mLEP管中,分別為對照管及測定管,按照測定步驟操作,取上清稀釋5倍進行測定,用1mL玻璃比色皿測定吸光值,計算ΔA測定= A測定-A對照=0.973-0.133=0.84,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.499-0=0.499,按土壤質(zhì)量計算酶活得:

FDA活性(U/g 土樣)=48×(ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn))÷W×5(稀釋倍數(shù))= 4040.08 U/g 土樣。


參考文獻(xiàn):

[1] Sánchez-Monedero M A, Mondini C, Cayuela M L, et al. Fluorescein diacetate hydrolysis, respiration and microbial biomass in freshly amended soils[J]. Biology and Fertility of Soils, 2008, 44(6): 885-890.

[2] Paudel B R, Udawatta R P, Anderson S H. Agroforestry and grass buffer effects on soil quality parameters for grazed pasture and row-crop systems[J]. Applied Soil Ecology, 2011, 48(2): 125-132.


相關(guān)系列產(chǎn)品:

BC0240/BC0245  土壤蔗糖酶(S-SC)活性檢測試劑盒

BC0140/BC0145  土壤酸性磷酸酶(S-ACP)活性檢測試劑盒

BC0460/BC0465  土壤中性磷酸酶(S-NP)活性檢測試劑盒

BC0280/BC0285  土壤堿性磷酸酶(S-AKP/ALP)活性檢測試劑盒


土壤FDA水解酶活性檢測試劑盒  


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