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大鼠促性腺激素釋放激素(GnRH)ELISA試劑盒
產(chǎn)品簡介:

fk2062Y大鼠促性腺激素釋放激素(GnRH)ELISA試劑盒Rat gonadotropin-releasing hormone,GnRH ELISA Kit48T/96T

產(chǎn)品型號:fk2062Y

更新時間:2022-08-12

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大鼠促性腺激素釋放激素(GnRH)ELISA試劑盒組成:

試劑盒組成

48孔配置

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1份

 

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2片(48)

2片(96)

 

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1個

1個

 

酶標(biāo)包被板

1×48

1×96

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標(biāo)準(zhǔn)品

0.5ml×1瓶

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標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1瓶

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酶標(biāo)試劑

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樣品稀釋液

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6 ml×1瓶

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顯色劑A液

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6 ml×1瓶

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3 ml×1瓶

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終止液

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20倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

30ml×1瓶

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在大鼠促性腺激素釋放激素(GnRH)ELISA試劑盒中,進(jìn)行各項實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:

(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

(2)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。

(3)酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。

(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是雙氧水在臨用前加入。

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