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一文讀懂助溶劑--小試劑如何發(fā)揮大作用

更新時間:2025-12-03點擊次數:175

難溶性藥物與加入的第三種物質在溶劑中形成可溶性分子間的絡合物、締合物或復鹽等,以增加藥物在溶劑中的溶解度,這第三種物質稱為助溶劑(Hydrotropicagent)。一般來說,助溶劑可溶于水,多為低分子化合物,與藥物形成絡合物后,可數倍甚至數十倍增加藥物的溶解度。

聚乙二醇是一種高分子聚合物,可用于藥物緩釋和固定化酶的載體、醫(yī)用高分子材料表面改性等多種方面的研究。

能與一些有機分子形成包合物,從而增加這些物質在水中的溶解度和穩(wěn)定性,常用于增溶難溶性藥物或生物活性成分。

Tween-80/Triton X-100:形成膠束,幫助溶解脂類、膜蛋白。注意:高濃度可能破壞細胞膜!

SDS(十二烷基硫酸鈉):強變性劑,溶解膜蛋白和疏水多肽。

可以有效的幫助脂溶性強的化合物溶解,可作為藥物分子的載體,是常用的助溶劑/增溶劑。


緩沖溶劑用途:

維持pH穩(wěn)定,保護生物分子活性(如酶、DNA、蛋白質)。

常見溶劑:

PBS(磷酸鹽緩沖液):細胞清洗、免疫組化。

Tris-HCl:核酸電泳、蛋白質純化。

HEPES:細胞培養(yǎng)、酶反應體系。


注意:助溶劑作用機制多樣,能提高難溶物溶解度且具有選擇性,不改變主成分性質,在生物領域生物相容性良好。但使用時需嚴格控制用量范圍,依據溶質特性選擇,用于生物相關實驗時做好安全性評估。


如何選擇實驗溶劑

1-蛋白質相關實驗

1、維持蛋白質活性:

在研究蛋白質活性時,常用緩沖溶液,如磷酸緩沖液(PBS)。因其能維持穩(wěn)定 pH 值,接近蛋白質的生理環(huán)境,可避免蛋白質因 pH 波動而變性。

2、蛋白質純化:

對于蛋白質純化實驗,除了緩沖液,還可能用到含溫和去污劑的溶液。如 Triton X-100,可溶解細胞膜等脂質成分,幫助釋放蛋白質,同時盡量減少對蛋白質結構的破壞,利于后續(xù)的分離純化步驟。

3、蛋白質結晶:

進行蛋白質結晶實驗,為促進蛋白質有序排列形成晶體,常選用特定 pH 值和離子強度的緩沖溶液。例如,在一些蛋白質結構解析實驗中,會使用含有硫酸銨、氯化鈉等鹽類的緩沖體系,調節(jié)溶液條件,促使蛋白質結晶。


2-核酸相關實驗

1、核酸提取:

在從細胞或組織中提取核酸時,常使用酚 - 氯-仿混合液。酚能使蛋白質變性,氯-仿可促進相分離,將蛋白質沉淀到有機相和水相的界面,核酸則保留在水相,從而實現核酸與蛋白質等雜質的有效分離。

2、核酸雜交:

核酸雜交實驗需要保證核酸分子準確配對雜交,常用含特定鹽離子濃度的緩沖液,如 SSC 緩沖液。它能調節(jié)溶液離子強度,促進核酸分子的復性和雜交反應,確保實驗順利進行。

3、核酸擴增(PCR):

PCR 實驗對反應體系要求嚴格,一般使用 Tris-HCl 緩沖液作為溶劑基礎。其可維持反應體系的 pH 穩(wěn)定。


3-細胞相關實驗

1、細胞培養(yǎng):

細胞培養(yǎng)需要模擬體內環(huán)境,水是基礎溶劑,搭配各種營養(yǎng)物質組成培養(yǎng)液。例如,常用的 DMEM 培養(yǎng)基,以水為溶劑,添加了氨基酸、維生素等成分,為細胞生長提供所需營養(yǎng),維持細胞正常生理功能。

2、細胞凍存:

細胞凍存時,為防止細胞在低溫下受損,會使用含有保護劑的溶劑。如含 10% 二甲基亞砜(DMSO)的胎牛血清,DMSO 能降低細胞內冰晶的形成,減少對細胞的損傷,幫助細胞在低溫下長期保存。

3、細胞染色:

細胞染色實驗中,根據不同染色劑的性質選擇溶劑。如用蘇木-精 - 伊紅(HE)染色時,蘇木-精染液常用乙醇作為溶劑,伊紅染液則以水為溶劑。


4-脂質相關實驗

1、脂質提取:

脂質不溶于水,提取脂質常用有機溶劑。如氯-仿 - 甲醇混合溶劑,能有效溶解各類脂質。

2、脂質體的制備:

制備脂質體時,常用氯-仿、甲醇等有機溶劑溶解脂質材料。

3脂肪酸分析:

在脂肪酸分析實驗中,正己烷是常用溶劑。它能提取樣品中的脂肪酸,且在后續(xù)的氣相色譜分析等過程中,不會對脂肪酸的檢測產生干擾,保證分析結果的準確性。


5-動物相關實驗

考慮藥物性質,脂溶性藥物如紫杉醇常用PEG-400 溶解;再考慮動物生理特性,小鼠對少量 DMSO 耐受性較好,兔子則較差;還需適配給藥方式,口服難溶性藥物可選羧甲基纖維素鈉溶液,如給大鼠灌胃中藥提取物,注射給藥要依據不同注射類型選合適溶劑,像肌肉注射常用生理鹽水。


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