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elisa酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)直接法和間接法優(yōu)缺點(diǎn)比較

因?yàn)镋LISA酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)具有快速、靈敏、簡便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。已成為分析化學(xué)領(lǐng)域中的前沿課題，它是一種特殊的試劑分析方法。elisa可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個(gè)必要的試劑：（1）固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent)；（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate)；（3）酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測的具體條件,可設(shè)計(jì)出各種不類型的檢測方法。elisa可根據(jù)抗原抗體的結(jié)合情...

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ELISA試劑盒發(fā)展趨勢

國內(nèi)ELISA試劑盒發(fā)展起步較晚，1985年才研制了我國*批國產(chǎn)生化診斷試劑。但受益于醫(yī)療消費(fèi)水平的提高、醫(yī)療體制改革的推動(dòng)、國家產(chǎn)業(yè)政策的扶持，以及本身具有的一次性消費(fèi)的特點(diǎn)，IVD行業(yè)將會(huì)以15%~20%的速度高速增長。特別是醫(yī)改中的某些規(guī)定，讓我們看到了體外診斷試劑未來極富想象力的創(chuàng)富空間。比其對基本藥物的“零加成”的規(guī)定，使得基層醫(yī)院藥品收入頓時(shí)減少，于是化驗(yàn)單成為另一個(gè)開源對象，檢驗(yàn)科的地位也將提升，而且隨著例行體檢的加快普及，體檢的人數(shù)越來越多。新醫(yī)改機(jī)會(huì)盡管落后...

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elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)顯色可能碰到的問題以及解決辦法

elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)的操作步驟有標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋、加樣、溫育、洗滌、顯色等等，然而在顯色這一步驟可能碰到的問題有：1、顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑；2、加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。相應(yīng)解決辦法：1、顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用；2、加樣時(shí)保持顯色劑不外流；3、A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。顯色是elisa實(shí)驗(yàn)的后一步溫育反應(yīng),所以顯色也是重要步驟之一。

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elisa試劑盒測試要求

elisa試劑盒測試時(shí)要做好對照以及對實(shí)驗(yàn)條件做好選擇。在進(jìn)行正式試驗(yàn)之前，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:（1）固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行...

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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)關(guān)重要的步驟

elisa試劑盒是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。雖然elisa試劑盒的操作步驟看似簡單，但沒做到位的話就會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的效果。所以elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)關(guān)重要的步驟有：*、重要的洗滌：不充分的洗滌會(huì)導(dǎo)致差異和高背景，從而帶來不理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如果未結(jié)合的材料殘留在微孔板中，那么它會(huì)增加背景噪音。有必要的話，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會(huì)阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。如果背景過高，懷疑洗滌不夠時(shí)，可以嘗試增加洗滌次數(shù)。第二、關(guān)鍵的封閉：封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中...

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elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)前期準(zhǔn)備

elisa試劑盒試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。而在實(shí)驗(yàn)之前需要準(zhǔn)備的東西有：1、準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料（如：微量移液器、吸頭、醫(yī)用蒸餾水等）。2、濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1：4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液。3、使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置少30分鐘。4、用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中，充分混勻待用。5、濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1：19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液。elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)...

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elisa試劑盒洗滌對試驗(yàn)的影響

洗滌是elisa試劑盒測定過程中決定實(shí)驗(yàn)成敗的一個(gè)關(guān)鍵步驟。洗滌可采用洗板機(jī)或手工洗滌兩種方式，手工洗板則分為浸泡式和流水沖洗式洗滌。無論洗板方式如何，在向板孔內(nèi)注液時(shí)應(yīng)當(dāng)避免氣泡殘留孔內(nèi)，否則會(huì)因洗滌液難以進(jìn)入孔中而影響洗滌效果。洗滌目的是去除反應(yīng)體系中與反應(yīng)無關(guān)的成分、未結(jié)合的酶結(jié)合物以及反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。由于抗原和抗體的包被通常是在堿性條件下與固相的疏水鍵相互作用而被動(dòng)吸附于其上的，因此必須注意非離子去垢劑的使用濃度，常用的洗滌液是含0.05％...

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elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)誤差的種類

elisa試劑盒是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。然而在實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一些誤差，這些誤差分為：系統(tǒng)誤差、隨機(jī)誤差和過失誤差。1．系統(tǒng)誤差是指一系列測定結(jié)果與真值或靶值存在有同一傾向的誤差，有明顯的規(guī)律性，可在一定條件下重復(fù)出現(xiàn)，是可以通過質(zhì)控預(yù)防和校正的。2．隨機(jī)誤差又稱偶然誤差，是一種偶然的、未能預(yù)料到的誤差，是難以避免和校正的誤差。檢驗(yàn)工作中隨機(jī)誤差的分布符合正態(tài)分...

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