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核酸純化的原理

核酸抽提與純化是分子生物學(xué)試驗的基礎(chǔ)，核酸純化方法是影響提取核酸質(zhì)量高低的重要因素，也是下游分子生物學(xué)試驗成敗的關(guān)鍵。核酸純化的方法及原理如下：一、PC抽提法PC抽提是去除蛋白質(zhì)有效的手段，但超過了該飽和度，裂解體系中的蛋白質(zhì)不會被一次去除，必須靠多次抽提，方可*去除。且每次抽提都會損失部分核酸。另外，體系太粘稠的壞處是，蛋白質(zhì)難以*去除，以及基因組DNA會斷裂得更厲害，所以要注意裂解液與樣品的比例。PC抽提的另外一個用途是，利用酸性酚可以部分去除DNA的特點，在RNA抽提時...

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DMEM培養(yǎng)基的使用方法及特點

DMEM是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基，高糖型有利于細(xì)胞停泊于一個位置生長，適于生長較快、附著較困難腫瘤細(xì)胞等。該類培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于疫苗生產(chǎn)和各種初代病毒宿主細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)及單一細(xì)胞培養(yǎng);如A9、3T6、BALB/3T3、COS-1、COS-3、COS-7、L6、WEHI-3b等細(xì)胞系的培養(yǎng)。DMEM培養(yǎng)基的成分DMEM培養(yǎng)基的配制方法：1制備新鮮三蒸水或超純水。2稱取所需量的干粉培養(yǎng)基，加入約終體積一半的三蒸水中;若配制一個包裝的培養(yǎng)液，在將整個包裝的干粉倒入三蒸水后，...

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細(xì)胞培養(yǎng)血清的作用及分類

血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機械損傷、對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護作用。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,具有極為重要的功能.細(xì)胞培養(yǎng)血清的作用1.在細(xì)胞培養(yǎng)中提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物.2.提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、...

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簡述細(xì)胞培養(yǎng)的步驟

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。現(xiàn)代生物技術(shù)一般認(rèn)為包括基因工程技術(shù)、細(xì)胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù)，而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切關(guān)系，特別是在醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展，細(xì)胞培養(yǎng)更具有特殊的作用和價值。以下來具體講一下細(xì)胞培養(yǎng)的步驟。細(xì)胞培養(yǎng)的步驟一、細(xì)胞復(fù)蘇：1.將新鮮培養(yǎng)基置于37℃水浴鍋中回溫，回溫后噴以75%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。如配置：50mL*培養(yǎng)基(含10%FBS，1%青鏈霉素雙抗)44.5mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5m...

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細(xì)胞培養(yǎng)瓶規(guī)格及各種形狀使用方法

細(xì)胞培養(yǎng)瓶，主要用來培養(yǎng)細(xì)胞的。一般根據(jù)瓶子容積細(xì)胞培養(yǎng)瓶規(guī)格有5500ml供選擇。根據(jù)材質(zhì)可以分為玻璃的和塑料的，底部形狀有正方形、長方形、三角形等，根據(jù)瓶子容積有5500ml供選擇。另外，表面經(jīng)過特殊改性處理后，可以讓細(xì)胞更好的進行貼壁培養(yǎng)，這樣根據(jù)細(xì)胞貼壁面積又可以分為25～175cm2多種。國產(chǎn)的細(xì)胞培養(yǎng)瓶一般蓋子都是封閉的，不帶內(nèi)墊，常用于密閉培養(yǎng)，可保證其密閉性;進口的培養(yǎng)瓶的蓋子樣式比較多：密閉蓋、聚酯蓋、透氣蓋、隔墊蓋等。密閉蓋的性能和國產(chǎn)的是相同的，聚酯蓋常...

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比色皿的使用和清洗

比色皿透光面是由能夠透過所使用的波長范圍的光的材料制成。在200-350nm工作的比色皿適用于紫外區(qū),必須使用石英或熔熔硅石制成透光面的石英比色皿。(注：熔熔硅石的俺還真沒見過，只用過石英的，哪位板油要是有的話，一定要讓俺看看，開開眼界啊)石英比色皿既可用于紫外區(qū)又可用于可見區(qū)，但是價格一般比較貴哦，所以要根據(jù)使用波長選擇比色皿，如果不用紫外區(qū)的話，用普通玻璃比色皿就行了，一則浪費沒必要，二則，嘿嘿，摔碎了也不心疼，哈哈。而普通硅酸鹽光學(xué)玻璃制成的透光面的比色皿,只能用于35...

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表面活性劑的使用原理

表面活性劑就是通過降低反應(yīng)物質(zhì)表面的活化能，促進物質(zhì)表面活化的一種活化劑。一類能降低液體表面張力的試劑.通常在分子內(nèi)含有一個疏水基團和一個親水基團,如去垢劑、乳化劑、消泡劑等.表面活性劑的原理表面活性劑的工作原理就是一個火柴棍結(jié)構(gòu)的模式，表面活性劑的結(jié)構(gòu)類似一根火柴棍,火柴頭就是親水端,火柴桿就是親油端.親油端插入油污分子內(nèi)部,相似相容；親水端跟水分子結(jié)合形成膠束團.這樣,再經(jīng)過機械摩擦運動,就將油污分子疏松開來,拉進水中,從而達到膨化、溶解、擴散、洗滌油污的目的.表面活性劑...

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YNB培養(yǎng)基的成分及滅菌方法

以下是TNB培養(yǎng)基的成分，本品僅用于研發(fā)，而不是用于藥物、家庭或其他用途。配制途中可因培養(yǎng)物不同而適當(dāng)添加或減少其他成份。YNB培養(yǎng)基的成分NitrogenSource（氮源）AmmoniumSulfate（硫酸銨）...............................................5gVitamins（維生素）Biotin（生物素）........................................................2μg...

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