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小鼠胚胎干細(xì)胞可分化成小腦神經(jīng)細(xì)胞

日本理化研究所13日發(fā)布新聞公報(bào)稱，該所研究人員成功誘導(dǎo)小鼠胚胎干細(xì)胞，有選擇性地分化成小腦神經(jīng)細(xì)胞，且實(shí)現(xiàn)了較高的分化效率。理化研究所發(fā)展生物學(xué)研究中心的研究小組，改進(jìn)了此前培育大腦神經(jīng)細(xì)胞的無血清浮游培養(yǎng)法，開發(fā)出一種能在試管內(nèi)再現(xiàn)胚胎發(fā)育過程中小腦發(fā)育環(huán)境的新方法。公報(bào)說，小腦皮質(zhì)中層內(nèi)的浦肯雅細(xì)胞是掌管運(yùn)動(dòng)和學(xué)習(xí)的主要神經(jīng)細(xì)胞，在醫(yī)學(xué)方面具有相當(dāng)重要的作用，以往誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞有選擇性地分化成浦肯雅細(xì)胞的方法效率低下，只有約0.5％的胚胎干細(xì)胞終能分化成浦肯雅細(xì)胞。在實(shí)...

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揭示脫落酸替代小分子的功能及選擇性機(jī)理

脫落酸（Abscisicacid,ABA）是植物中為重要的激素之一，它與植物生長(zhǎng)發(fā)育和抗逆抗旱等生理過程都有極為密切的關(guān)系。2009年4月，美國(guó)和歐洲的兩個(gè)研究組獨(dú)立發(fā)現(xiàn)了一類被命名為PYR1/PYL/RCAR的蛋白可能為ABA受體。同年秋，顏寧教授的研究組和美國(guó)、日本、歐洲的其他四個(gè)研究組分別利用結(jié)構(gòu)生物學(xué)和生物化學(xué)方法獨(dú)立證實(shí)了這類蛋白就是ABA受體，并且揭示了其作用分子機(jī)制。ABA受體的發(fā)現(xiàn)與結(jié)構(gòu)生物學(xué)鑒定被Science雜志評(píng)為2009年度突破之一。近期的Journa...

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Porcine HSP-70

FORRESEARCHUSEONLYAssayrange：20pg/ml-480pg/ml96determinationsPurposeThiskitallowsforthedeterminationofHSP-70concentrationsinPorcineserum,cellculturesupernatesａndotherbiologicalfluidsPrincipleoftheassayThekitassayPorcineHSP-70levelinthesampl...

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干細(xì)胞的原代提取

胚胎干細(xì)胞免疫學(xué)法是較為常用的分離方法，它可選擇性地殺死囊胚外層的滋養(yǎng)層細(xì)胞，而僅保留ICM。它的原理是先將胚泡與抗小鼠的血清共同孵化一段時(shí)間后，然后加入補(bǔ)體，在補(bǔ)體的作用下，外層的滋養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生溶解，而ICM則不受影響。神經(jīng)干細(xì)胞目前，神經(jīng)干細(xì)胞的分離方法主要有三種：無血清培養(yǎng)基自然篩選法、流式細(xì)胞術(shù)分選法、免疫磁珠分選法。無血清培養(yǎng)基自然篩選法是迄今應(yīng)用為廣泛，也是簡(jiǎn)單和容易操作且行之有效的方法。其原理是利用特殊的培養(yǎng)基使成熟的神經(jīng)細(xì)胞無法較長(zhǎng)時(shí)間地成活，而分離篩選出能夠在...

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胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程

一般培養(yǎng)——維持ES細(xì)胞處于未分化狀態(tài)ES細(xì)胞培養(yǎng)用含有ESGRO（白血病抑制因子）的高糖培養(yǎng)基來阻止細(xì)胞的分化。為細(xì)胞提供包被有0.1％明膠的平板作為粘附細(xì)胞的基質(zhì)。建議每2－3天從達(dá)到80％－90％融合的平板按1：8的比率傳代細(xì)胞一次，細(xì)胞傳代以后，在將細(xì)胞接種在0.1％明膠包被的培養(yǎng)皿之前，通過預(yù)先將細(xì)胞接種在沒有經(jīng)過包被的組織培養(yǎng)板2個(gè)小時(shí)，使分化細(xì)胞粘附，從而將分化和未分化細(xì)胞分開。將細(xì)胞全程置于37℃，5％CO2，100％濕度條件下培養(yǎng)。培養(yǎng)基ES:配制一20×不...

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大腸桿菌轉(zhuǎn)化時(shí)免熱激及孵育的方法

中山大學(xué)的徐曉鵬博士向大家介紹了一種質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí)免熱激及孵育的方法。背景：目前外源質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌的步驟，需要先將質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞在冰上撫育半小時(shí)，然后42度熱激90秒，加液體培養(yǎng)基緩搖1個(gè)小時(shí)左右再離心涂板。其中熱激步驟溫度和時(shí)間要求嚴(yán)格，熱激后大量菌細(xì)胞死亡，還要經(jīng)過液體培養(yǎng)基撫育才能涂板。方法改進(jìn)：我們可以在做質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞在冰上撫育的同時(shí)，將要涂的平板放在37度培養(yǎng)箱里，當(dāng)撫育結(jié)束后，立即涂到已經(jīng)加熱到37度的平板上，利用培養(yǎng)板的熱度代替熱激，平板可以直接放回...

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蛋白質(zhì)（酶）的提取

大部分蛋白質(zhì)都可溶于水、稀鹽、稀酸或堿溶液，少數(shù)與脂類結(jié)合的蛋白質(zhì)則溶于乙醇、丙酮、丁醇等有機(jī)溶劑中，因些，可采用不同溶劑提取分離和純化蛋白質(zhì)及酶。1.有機(jī)溶劑提取法一些和脂質(zhì)結(jié)合比較牢固或分子中非極性側(cè)鏈較多的蛋白質(zhì)和酶，不溶于水、稀鹽溶液、稀酸或稀堿中，可用乙醇、丙酮和丁醇等有機(jī)溶劑，它們具的一定的親水性，還有較強(qiáng)的親脂性、是理想的提脂蛋白的提取液。但必須在低溫下操作。丁醇提取法對(duì)提取一些與脂質(zhì)結(jié)合緊密的蛋白質(zhì)和酶特別*，一是因?yàn)槎〈加H脂性強(qiáng)，特別是溶解磷脂的能力強(qiáng)；二是...

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大鼠I型膠原（collagen I）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

檢測(cè)范圍：96T20ug/L-800ug/L使用目的：本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中I型膠原（collagenI）含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠I型膠原（collagenI）水平。用純化的大鼠I型膠原（collagenI）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入I型膠原（collagenI），再與HRP標(biāo)記的I型膠原（collagenI）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP...

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